Содержание
- направления
- Подготовка материалов
- Размещение спор на пластинах
- Выделение чистой культуры
- Подготовка потомства
- Прививка субстрата для роста грибов
- чаевые
- предупреждение
- Что вам нужно
Грибы могут быть выращены из спор или культуры ткани. Споровые культуры приводят к популяциям генетически разных грибов. Это полезно при выделении и тестировании новых штаммов. Процедуры развития грибов являются видоспецифичными. Предполагается, что производитель знает, как вырастить интересующий гриб, в частности, когда будет получено достаточно потомства.
направления
Коллекция грибов Агарикуса (Фото Яна Гранта, Джейсона Холлингера)-
Подготовьте от 500 до 1000 мл МЭА в соответствии с инструкциями производителя.
-
Поместите раствор хлорида натрия в пробирки и МЭА в колбы Эрленмейера. Не заполняйте пробирки и флаконы более чем на полпути и слегка накрывайте.
-
Стерилизовать раствор чашек с хлоридом натрия, МЭА и Петри (если не стерильный) в скороварке при 121 градусах Цельсия и 1 атм в течение 15-20 минут.
-
Удалите MEA, раствор хлорида натрия и чашки Петри из скороварки и дайте остыть.
-
Когда МЭА достаточно остыл, чтобы с ним можно было работать, но перед затвердеванием осторожно снимите крышку с каждой чашки Петри и залейте 10-20 мл расплавленного МЭА.
-
Разрешить MEA и хлорид натрия пластины остыть до комнатной температуры.
Подготовка материалов
-
Стерилизовать крючок в спиртовой лампе. Дайте проводу нагреться, пока он не станет красным, затем дайте ему остыть в течение 5 секунд.
-
Опустите крючок в раствор хлорида натрия, чтобы собрать каплю жидкости. Нанесите каплю на небольшую область в виде спор (или другого источника спор), чтобы создать смесь жидкости / спор. Повторите этот процесс несколько раз, стерилизуя крючок между ними.
-
Окуните крючок в суспензию хлорида натрия и спор, чтобы собрать споры.
-
Поднимите крышку пластины с агаром настолько, чтобы обеспечить доступ к крючку.
-
Распространите суспензию спор с крючка на поверхность агара и снова возьмите тарелку. Повторите столько карт, сколько вы хотите (по крайней мере, пять или шесть).
-
Закройте агаровые пластины полиэтиленовой пленкой, чтобы предотвратить сухость. Инкубируйте споры при соответствующей температуре и условиях освещения для вида.
-
Соблюдайте признаки каждые несколько дней в поисках признаков прорастания. Белый пушистый рост (мицелий) на поверхности агара указывает на наличие гриба (но не может быть грибком, который вырос из спор).
Выращивание грибов из спор
Размещение спор на пластинах
-
Сравните мицелий с опубликованными описаниями мицелия, который вы пытаетесь вырастить.
-
Если мицелий выглядит так, как ожидалось, очистите культуру, вырезав кусочки и перенеся их на чашки со свежим агаром.
-
Продолжайте резать кусочки на кончиках расширяющихся колоний, пока в чистой колонии не останется бактерий.
Выделение чистой культуры
-
Разрежьте и перенесите кусочки очищенного мицелия в стерилизованные сосуды с волокнами или подложку из древесной щепы. Тип используемого субстрата зависит от вида грибов.
-
Инкубируйте основной мицелий в условиях, подходящих для вида, пока субстрат не будет полностью колонизирован мицелием.
-
Периодически встряхивайте контейнеры мицелия, чтобы фрагментировать субстрат и ускорить колонизацию.
-
Используйте основной мицелий, чтобы привить другие контейнеры и произвести больше мицелия.
Подготовка потомства
-
Энергично встряхните контейнеры мицелия, чтобы их фрагментировать.
-
Поместите мицелию в пакеты или поддоны для роста грибов.
-
Тщательно перемешайте мицелий на субстрате, помешивая или помешивая.
-
Действуйте согласно опубликованным методам о том, как вырастить мицелий и начать процесс плодоношения выращиваемого вида.
Прививка субстрата для роста грибов
чаевые
- Работайте быстро при заливке агара или переносе инокулята для уменьшения загрязнения.
- Время и усилия можно сэкономить, купив стерильные и предварительно приготовленные чашки с агаром.
- MEA является хорошей общей средой для выращивания грибов, но другой тип среды может быть более подходящим в зависимости от вида.
предупреждение
- Скороварки могут нагреться и стать причиной травмы. Следуйте инструкциям производителя по обслуживанию и эксплуатации.
- Стерилизованные контейнеры являются горячими и должны быть обработаны термостойкими перчатками для предотвращения ожогов и разливов.
- Дайте крышкам контейнера свободно стерилизоваться, чтобы обеспечить выравнивание давления в процессе нагревания и охлаждения.
- Все стерилизуемые контейнеры должны быть изготовлены из автоклавируемого материала.
Что вам нужно
- Грибные Споры
- Солод с экстрактом агара (МЭА)
- Чашки Петри (тарелки)
- Подложка подходит для видов
- Алкогольная лампа
- Крючок для прививок
- Раствор хлорида натрия (0,9% мас. / Об.)
- Скороварка
- Пробирки
- Колбы Эрленмейера
- Полиэтиленовая пленка
- Сосуды или мешки для производства мицелия