Содержание
- направления
- Приготовление экстракта картофеля
- Готовим смесь
- стерилизация
- Заливка смеси
- чаевые
- предупреждение
- Что вам нужно
Агар-декстроза картофельная (BDA) является хорошей полутвердой средой общего назначения, используемой для создания грибов. Он также часто используется для выделения, выращивания и поддержания грибов в процессе формирования. Готовые чашки Петри или пробирки, содержащие BDA, можно купить, или BDA можно быстро приготовить, используя коммерческий премикс. Тем не менее, это не сложно сделать простой и эффективный вариант с низкой стоимостью.
направления
-
Положите картофель в кастрюлю с 1,2 л водопроводной воды и варите на медленном огне в течение часа.
-
Снимите кастрюлю с огня и охладите жидкость до удобного обращения (около десяти минут).
-
Вылейте жидкий картофельный экстракт через фильтр или марлю и соберите его в другой контейнер.
Приготовление экстракта картофеля
-
Добавьте декстрозу и агар в литр воды из экстракта картофеля.
-
Проверьте pH раствора с помощью тестера или pH-метра.
-
Если рН выше 6,5, уменьшите его, добавляя по одной капле раствора соляной кислоты каждый раз и проводя еще один тест.
-
Если pH меньше 6, отрегулируйте его, добавляя по одной капле раствора гидроксида натрия за раз и проводя новый тест.
Готовим смесь
-
Хорошо перемешайте и разделите на более мелкие партии по 250 мл. Разлить в четыре флакона по 500 мл (каждый флакон должен быть наполовину, чтобы не кипеть).
-
Заряжайте каждый флакон куском свободно свернутой алюминиевой фольги, чтобы пленка не падала, но и не создавала полной герметизации.
-
Поставьте банки в скороварку.
-
Используйте скороварку в соответствии с инструкциями производителя по стерилизации BDA при 121 ° C и 15 фунт / кв.дюйм в течение 15 минут.
-
Выключите скороварку и дайте ей вернуться к атмосферному давлению, затем снимите флаконы и дайте им остыть, пока они не будут обработаны.
стерилизация
-
Выровняйте чашки Петри на плоской поверхности.
-
Как только флаконы охладятся до температуры обработки, но до того, как среда начнет затвердевать, одной рукой держите флакон, а другой - снимите крышку из фольги.
-
Для каждой чашки Петри снимите крышку одной рукой, быстро заполните половину жидкой BDA и установите крышку на место.
-
Повторите шаг 3 выше, пока все чашки Петри не будут заполнены.
-
Если остатки BDA остались, достаньте бутылку с оригинальной крышкой из фольги, дайте ей остыть и затвердеть, закройте алюминиевую крышку и храните в холодильнике.
Заливка смеси
чаевые
- Большинство грибов хорошо растут в слабокислых условиях, поэтому конечное значение рН должно быть между 6 и 6,5, хотя его можно отрегулировать до любого значения рН, необходимого для конкретного вида.
- Пусть крышки чашки Петри откроются настолько, чтобы смесь могла быть налита и покрыта как можно быстрее.
- Требуется практика, чтобы получить скорость и эффективность при разливе агара в чашках Петри.
- После охлаждения и затвердевания посуду BDA можно завернуть в пластик и хранить в холодильнике в течение нескольких месяцев.
- Большая часть водопроводной воды содержит минералы, полезные для роста грибов, однако, если в местной воде очень высокие концентрации минералов или очень высокий или низкий pH, замените ее дистиллированной водой.
предупреждение
- Следуйте всем инструкциям по эксплуатации и безопасности для скороварки, которая будет использоваться.
- При стерилизации скороварки оставьте крышки бутылок незакрепленными, чтобы избежать избыточного давления.
- Носите термостойкие перчатки при работе с горячими контейнерами.
- Надевайте защитные очки при работе на скороварке, при извлечении стерильной BDA и при разливе.
Что вам нужно
- 300 г картофеля, очищенного и нарезанного
- сковорода
- Кухонный фильтр
- PH тестер или рН-метр
- 1 моль соляной кислоты
- 1 молярная гидроокись натрия
- 4 стеклянных флакона Эрленмайера на 500 мл (или другие автоклавируемые контейнеры с узким горлом)
- 10 г порошка декстрозы (глюкозы)
- 20 г агара
- Алюминиевая фольга
- Скороварка
- Стерильные чашки Петри