Как рассчитать мертвое время в колонке для жидкостной хроматографии

Автор: John Webb
Дата создания: 16 Август 2021
Дата обновления: 16 Ноябрь 2024
Anonim
Хроматография.  Основные параметры
Видео: Хроматография. Основные параметры

Содержание

Хроматография широко используется в химических лабораториях для определения неизвестного компонента. Этот компонент протекает через оберточный материал колонки и взаимодействует с частицами. Взаимодействия между частицами и компонентами в образце основаны на притяжении или растворимости между ними. Молекулы, которые не взаимодействуют с частицами материала оболочки, могут беспрепятственно проходить через нее. Время, необходимое для прохождения молекул от точки ввода в систему на максимальном пике нереактивной молекулы, является мертвым временем колонки.

Шаг 1

Усильте неизвестный образец небольшим количеством соединения, которое не удерживается материалом колонки. Компаунд будет проходить через колонку, не взаимодействуя с оберточным материалом колонки.


Шаг 2

Загрузите в шприц примерно 20 микролитров образца и вставьте иглу шприца в порт для инъекции. Загрузите петлю для образца из клапана, опустив шприц в клапан.

Шаг 3

Включите хроматографический прибор и запустите подвижную фазу. Эта фаза проходит через прибор и отбирает образец через колонку и детектор, который заканчивается приемником для отходов.

Шаг 4

Активируйте клапан, который позволяет пробе попасть в путь потока жидкости. Это загружает компоненты пробы в верхнюю часть колонки, и начинается разделение.

Шаг 5

Наблюдайте за сигналом эмиттера детектора и идентифицируйте первый пик в хроматографе. Разница между временем впрыска и максимумом первого пика, представленного компонентом усиления, и есть мертвое время.

Шаг 6

Измерьте расстояние между точкой впрыска и максимальной высотой первого пика. Умножьте расстояние на скорость бумаги или оси, чтобы найти мертвое время.