Содержание
ПЦР - это метод, используемый учеными для создания миллионов копий сегмента ДНК. Полимеразы - тип белкового фермента - помогают производить новые сегменты. Ученые часто используют Taq-полимеразу в ПЦР.
история
Полимераза Taq происходит от бактерии Thermus aquaticus, которая обитает в термальных водах. Кари Муллис и Фред Фалоона разработали ПЦР в середине 1980-х годов с использованием первоначально полимеразы Escherichia coli, но вскоре ученые начали использовать Taq в ПЦР, потому что она была более устойчивой к высоким температурам.
функция
ПЦР включает стадии денатурации, отжига и репликации, обычно повторяемые от 20 до 30 раз. Денатурация разделяет двойную цепь ДНК на изолированные цепи. На этапе отжига праймеры связываются с сегментами ДНК, которые будут скопированы. Taq-полимераза начинает работать на этапе репликации: полимераза собирает из каждой отдельной цепи ДНК, отмеченной праймером, новую двойную цепь.
льготы
Высокие температуры, необходимые для денатурирования ДНК, разрушают полимеразу E.coli, первоначально использованную в ПЦР, что требует добавления дополнительного фермента в каждый цикл. Taq-полимераза может противостоять этим температурам, поэтому ученые теперь могут автоматически выполнять несколько циклов ПЦР.
соображения
Taq-полимераза имеет относительно высокую частоту ошибок удвоения ДНК. Другие полимеразы, стабильные при высоких температурах, имеют более низкую частоту ошибок, но Taq по-прежнему наиболее часто используется из-за своей надежности и универсальности.